Цитокины атопический дерматит

Влияние иммунотропной наружной терапии на экспрессию генов цитокинов в коже и периферической крови больных атопическим дерматитом

Т.М. Филимонова 1 , О.Г. Елисютина 1 , Е.С. Феденко 1 , М.Н. Болдырева 1 , В.С. Смирнов 2

1 ФГБУ «ГНЦ «Институт иммунологии» ФМБА России, г. Москва

2 Медико-биологический научно-производственный комплекс «Цитомед», г. Санкт-Петербург

Скачать PDF

Цель. Изучить клиническую эффективность наружной иммунотропной терапии кремом Тимоген® 0,05% и ее влияние на некоторые иммунологические параметры в коже и крови больных атопическим дерма­титом (АтД).

Материалы и методы. В исследование включены 40 человек, которые разделены на основную (больные АтД, n=20) и контрольную группы (здоровые доноры, n=20). Всем больным АтД проведен непрерыв­ный курс лечения кремом Тимоген® 0,05% в течение 14 дней. Пациенты наносили препарат на все пора­женные участки кожи 2 раза в день тонким слоем. Клиническую эффективность лечения оценивали по изменению следующих параметров: исследовательской глобальной оценки, субъективной оценки ин­тенсивности зуда и сухости кожи по отношению к исследуемому участку кожи. Материалом для имму­нологического исследования служили образцы кожных биоптатов и периферическая кровь больных АтД и здоровых доноров. Экспрессию генов цитокинов в коже и периферической крови больных АтД опре­деляли методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Результаты исследования. На фоне терапии кремом Тимоген® 0,05% в течение 14 дней у всех больных АтД отмечен положительный клинический эффект: уменьшение сухости, высыпаний, интенсивности зуда кожи. При иммунологическом исследовании показателей экспрессии генов цитокинов в коже до и после лечения кремом Тимоген® 0,05% выявлено достоверное увеличение уровня экспрессии гена цито­кина интерлейкина-7 (ИЛ-7), уменьшение экспрессии генов цитокинов ИЛ-8, ИЛ-5 (p ® , в то время как при относительно низ­ком исходном содержании этих цитокинов их кон­центрация в крови возрастала. Также выявлено его стимулирующее влияние на дифференцировку Т-лимфоцитов, опосредующих гиперчувствитель­ность замедленного типа, усиление эффекторной активности Т-лимфоцитов в реакциях трансплан­тационного иммунитета [18].

Поскольку при АтД кожа является органом-ми­шенью аллергического воспаления, углубленное изучение именно локального иммунного ответа может оказаться наиболее информативным и по­зволит определить иммунные маркеры активности воспаления на разных стадиях заболевания и выя­вить критерии эффективности проводимой тера­пии, в особенности наружными препаратами.

Целью исследования явилось изучение клини­ческой эффективности наружной иммунотропной терапии кремом Тимоген® 0,05% и ее влияние на не­которые иммунологические параметры в коже и крови больных АтД.

Материалы и методы исследования

В исследование включены 40 человек, из них 23 женщины в возрасте от 17 до 50 лет и 17 мужчин в возрасте от 20 до 32 лет.

Группу больных АтД составили 20 человек в воз­расте от 16 до 48 лет. Диагноз АтД был установлен согласно критериям Hanifin и Rajka [19], модифи­цированным отечественными авторами и отражен­ным в Российском национальном согласительном документе по АтД [1]. У 16 пациентов (80%) дебют АтД отмечался в возрасте до 2 лет, при этом дли­тельность заболевания составляла от 15 до 48 лет, частота обострений составляла от 3 до 5 раз в год, у 9 (45%) больных заболевание носило торпидный характер с кратковременными периодами улучше­ния длительностью до 1 мес. При поступлении все больные АтД находились в фазе обострения основ­ного заболевания. Всем пациентам было проведе­но клинико-лабораторное аллергологическое и иммунологическое обследование.

Группу контроля составили 20 человек (практи­чески здоровые лица без признаков атопии в воз­расте от 19 до 32 лет).

Всем больным АтД проведено лечение обостре­ния АтД: антигистаминная терапия, местная увлаж­няющая терапия, непрерывный курс лечения кре­мом Тимоген® 0,05% в течение 14 дней. На протяже­нии всего периода исследования больные АтД не получали ни системные, ни топические ГКС. Па­циенты наносили препарат на все пораженные участки кожи 2 раза в день тонким слоем. Эффек­тивность терапии кремом Тимоген® 0,05% оценива­ли на ограниченном участке пораженной кожи вер­хних или нижних конечностей размером 10×10 см.

Материалом для исследования служили образ­цы кожных биоптатов, взятые методом пункцион­ной биопсии, и периферическая кровь больных АтД и здоровых доноров. Забор материала у больных АтД проводили до лечения в период обострения и на 14-й день лечения кремом Тимоген® 0,05%, а у здоровых доноров однократно.

Пункционную биопсию производили в асепти­ческих условиях с помощью одноразового стериль­ного пробойника диаметром 3 мм (Stumpp Medizin- technik GmbH, Германия) под местной анестезией 2% раствором лидокаина гидрохлорида. Экспрес­сию генов цитокинов в коже и периферической крови больных АтД определяли методом полиме­разной цепной реакции в реальном времени. Для выделения клеток из периферической крови и кожи использовали твердотельный термостат «Термит» производства компании «ДНК-Технологии» (Рос­сия). Для постановки обратной транскрипции ис­пользовали твердотельный термостат «Гном» про­изводства компании «ДНК-Технологии» (Россия). Постановку полимеразной цепной реакции в реаль­ном времени проводили на детектирующем термо­циклере «ДТ-96» «ДНК-Технологии» (Россия). Учет результатов реакции осуществляется автоматически с помощью программного обеспечения, поставля­емого с детектирующим амплификатором. В био­логических образцах, содержащих мРНК иссле­дуемого цитокина, программа фиксирует положи­тельный результат и определяет значение индика­торного цикла (Ср). Уровень экспрессии исследуе­мого цитокина измеряли в относительных единицах.

Проводили оценку экспрессии генов в клетках кожи и периферической крови следующих цитоки­нов: ИЛ-1Р, ИЛ-2, ИЛ-2г, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-7, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12а, ИЛ-12Р, ИЛ-15, ИЛ-^SP, ИЛ-17а, ИЛ-18, ИЛ-23, ИЛ-28, ИЛ-29, IFNG, TNF, TGF в, FOXP3.

Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ «Statistica 6.0».

Клиническую эффективность крема Тимоген® 0,05% оценивали на основании изменения иссле­довательской глобальной оценки (IGA — Investiga­tors’ Global Assessment) по 6-балльной шкале, где 0 баллов — чистая кожа (без признаков воспаления), 1 балл — почти чистая кожа (едва определяемая эритема, единичные папулы), 2 балла — легкий АтД (слабая эритема, папулы, инфильтрация), 3 балла — среднетяжелый АтД (умеренная эритема, умерен­но выраженные папулы), 4 балла — тяжелый АтД (выраженная эритема, инфильтрация, папулы), 5 баллов — очень тяжелый АтД (выраженная эри­тема, тяжелая инфильтрация, папулы с образова­нием корочек), субъективной оценки интенсивно­сти зуда и сухости кожи по 4-балльной шкале по отношению к исследуемому участку кожи.

Результаты и обсуждение

В основную группу были включены 20 человек, страдающих АтД, осложненным вторичной инфек­цией, у всех пациентов поражение кожи носило распространенный характер с локализацией на лице, шее, спине, груди и сгибательной поверхно­сти лучезапястных, локтевых и коленных суставов, отмечалось присоединение вторичной инфекции в виде мокнутия, фолликулита, присутствовал зуд от умеренного до сильного, усиливающийся в ночное время суток. Среднее значение индекса исследова­тельской глобальной оценки у больных АтД (n=20) при поступлении в период обострения составило 3,2±2,1, индекса зуда — 2,5±2,1, индекса сухости кожи — 3,1±1,7.

Эффективность крема Тимоген ® 0,05% у больных АтД

На фоне проводимой терапии кремом Тимоген® 0,05% у большинства больных АтД в течение 14 дней отмечалось значительное уменьшение ос­новных симптомов заболевания: зуда, сухости кожи, площади поражения кожи, количества вы­сыпаний, что отразилось в достоверном уменьше­нии средних значений индекса исследовательской глобальной оценки до 1,8±1,5, субъективных оце­нок зуда и сухости кожи — 1,6±1,2 и 2,2±1,4 (p ® 0,05%.

* — (p ® 0,05%, по оси ординат — шкала в бал­лах

Таким образом, использование крема Тимоген® 0,05% приводит к уменьшению основных симпто­мов АтД, а именно к уменьшению сухости, интен­сивности зуда, площади поражения кожи, что сви­детельствует о противовоспалительных, противо- зудных и увлажняющих свойствах препарата и о его эффективности при АтД.

Влияние крема Тимоген ® 0,05% на экспрессию генов цитокинов в коже и периферической крови больных АтД

При сравнении показателей экспрессии генов цитокинов в коже до лечения и после лечения кре­мом Тимоген® 0,05% в течение 14 дней отмечено до­стоверное увеличение уровня экспрессии гена ци­токина ИЛ-7 (р=0,047), уменьшение экспрессии генов ИЛ-8 (р=0,009) и ИЛ-5 (р=0,047) в коже боль­ных АтД по сравнению с теми же показателями до начала лечения. При сравнении данных показате­лей у больных АтД после лечения и у здоровых до­норов достоверных различий не выявлено (p>0,05 по критерию Манна-Уитни) (рис. 2).

Рис. 2. Сравнение экспрессии генов цитокинов в коже больных АтД и здоровых доноров до и после лечения кремом Тимоген ® 0,05%.

По оси абсцисс — значения экспрессии генов цитокинов в коже, по оси ординат — исследуемые цитокины

В периферической крови больных АтД до и пос­ле лечения кремом Тимоген® 0,05% различий в пока­зателях экспрессии генов цитокинов не отмечено.

Таким образом, в результате проведенного ис­следования показано, что при сравнении экспрес­сии генов цитокинов в коже больных АтД до и пос­ле лечения кремом Тимоген® 0,05% отмечается уменьшение экспрессии генов цитокинов ИЛ-5 и ИЛ-8, которые являются маркерами хронического воспаления, и увеличение экспрессии гена регуля­торного цитокина ИЛ-7,выявлена тенденция к нор­мализации данных показателей у больных АтД после лечения, приблизившихся к показателям здоро­вых доноров. Крем Тимоген® 0,05% обладает иммунотропной активностью, влияет на экспрессию ге­нов цитокинов в коже больных АтД и приводит к клиническому улучшению течения заболевания.

Использованные источники: cytomed.ru

ПОХОЖИЕ СТАТЬИ:

  Дерматит головы и шеи

  Дерматит долго проходит

ДЕРМАТИТЫ СКВОЗЬ ПРИЗМУ ЦИТОКИНОВ

В патогенезе дерматитов одно из ведущих мест отводится иммунологическим нарушениям.

В связи с этим возрастает роль исследований цитокинового профиля — набора цитокинов (небольших информационных молекул, продуцируемых клетками иммунной системы)[1].

Иммунология может быть весьма полезной в практике дерматологов. Возможности локального иммунитета в дерматологии пока оценены не в полной мере, считает профессор кафедры аллергологии и иммунологии Российского университета дружбы народов Наталья Татаурщикова[2].

На сегодняшний день врачи многих специальностей рассматривают кожу как отдельный орган, составляющий часть локального иммунитета. И система иммунитета кожи — это отдельный функционирующий подраздел, который контролирует огромное количество регуляторных функций.

Все патологические процессы, которые происходят в организме, сопровождаются обязательной реакцией со стороны иммунной системы. Большое количество клеток кожи непосредственно принимают участие в иммунном ответе: кератиноциты, меланоциты, клетки Лангерганса и др.

Известны два основных типа иммунного ответа организма на антиген — гуморальный и клеточный. Ответ гуморального типа состоит в выработке антител, которые циркулируют в крови и специфически связываются с чужеродными организму молекулами. Иммунный ответ клеточного типа включает образование специализированных клеток, реагирующих с антигеном посредством его связывания и последующего разрушения.

Чрезвычайно важно, чтобы сохранялся баланс между клеточным и гуморальным иммунитетом. СД4+ Т–хелперы — функциональная субпопуляция Т–лимфоцитов, которые продуцируют различные цитокины. Она, в свою очередь, делится на две большие антагонистические субпопуляции Тh1 и Тh2–лимфоцитов. Тh1–цитокины оказывают влияние на клеточный иммунитет, в то время как Тh2–цитокины стимулируют развитие В-лимфоцитов, секрецию ими антител и обеспечивают гуморальный ответ организма.

Иначе можно сказать, что Тh1 и Тh2–клетки различаются по своему цитокиновому профилю. И весьма большое значение имеет баланс в организме между Th1 и Th2–цитокинами. Этот баланс важен для предотвращения клинической манифестации кожных заболеваний, будь то воспалительный, инфекционный или неопластический процесс.

Установлено, что любые иммунозависимые дерматозы можно оценивать по соотношению Th1 и Th2–цитокинов. Иммунопатогенез этих заболеваний обусловлен нарушением баланса Th1 и Th2–клеток и профилей их цитокинов. Например, при контактном дерматите преобладает Th1–иммунный ответ, а при атопическом дерматите — Th2–иммунный ответ.

Важно, что кожа как орган иммунной системы, как орган локального иммунитета обладает способностью полномасштабного иммунного ответа. Поэтому при диагностике и лечении больного нужно обязательно понимать и оценивать кожный процесс с позиции заинтересованности системы иммунитета.

Сегодня иммунология предоставляет широкие возможности по оценке цитокинового профиля. Серьезные наработки имеются в отношении псориаза[3], крапивницы, контактного аллергического дерматита. Исследования показали: дисбаланс сывороточного содержания показателей цитокинового статуса лежит в основе ремоделирования эпителиального кожного барьера, пролонгирования иммунного ответа и формирования непрерывно рецидивирующего течения кожного процесса.

Успешная лекарственная терапия в дерматологии должна строиться с учетом современных научных данных о роли кожи именно как органа иммунной системы, принимающего участие в патогенезе различных клинических проявлений. Лекарственные препараты должны «задействовать» иммунопатологические процессы кожи.

Поскольку изменение цитокинового профиля является ключевым фактором иммунопатогенеза кожных заболеваний, представляется чрезвычайно важным для дерматологов владеть методиками оценки его параметров. Используя эти параметры в оценке дерматологических процессов, можно менять их и тем самым оптимизировать лечебные подходы, добиваясь максимальной эффективности.

Основным фактором нарушения качества жизни при атопическом дерматите является патологический зуд. С позиции неврологии проблема кожного зуда выглядит следующим образом. При длительно существующем зуде в коре головного мозга формируется доминанта — очаг патологического возбуждения. Происходит стереотипизация нервных процессов, и зуд из защитной реакции превращается в стандартную реакцию на любые внешние раздражители. Формирующиеся на коже морфологические изменения в виде расчесов–экскориаций трансформируются в последующем в лихенификацию и приводят к изменению чувствительности периферических рецепторов, снижению порога восприятия зуда и формированию ограниченного нейродермита.

Прервать этот порочный круг — одна из важнейших задач лечения. Патогенетическая терапия, которая направлена на медиаторы ответа острой фазы, позволяет подавить аллергическое воспаление и зуд и улучшить качество жизни пациента. Однако лечение зуда при атопическом дерматите представляет сложную задачу. Использование Н1–антигистаминных препаратов в качестве терапии первой линии довольно часто оказывается неэффективным.

ЧТО ДЕЛАТЬ? Схему лечения дерматитов можно кратко представить следующим образом. Если препараты первой линии выбора в лечении зуда не помогают, следует увеличить их дозу. При сохранении симптомов можно перейти к выбору альтернативной терапии. Если и это не помогает, следует выбрать другое альтернативное лечение.

Теперь самое время вернуться к оценке параметров цитокинового профиля. Характерный при иммунозависимых дерматозах феномен зуда реализуется благодаря воспалительным процессам в коже. И неэффективность антигистаминных препаратов в ряде случаев свидетельствует о том, что гистамин — совсем не единственный раздражитель и не доминирующий медиатор зуда при атопическом дерматите.

Современные исследования говорят о том, что при воспалении, помимо других многочисленных факторов, высвобождаются цитокины. Некоторые из них способны вызывать ощущение зуда. Активаторами зуда выступают интерлейкины: ИЛ–2, ИЛ–8, ИЛ–31. Наибольший интерес с этой позиции представляет интерлейкин ИЛ–31. Стафилококковый антиген быстро вызывает экспрессию ИЛ–31 у атопических индивидуумов, что указывает на новое звено в цепочке: стафилококковая колонизация с последующей активизацией Т–клеток и индукцией зуда у пациентов с атопическим дерматитом. Учет этого фактора дает дополнительные возможности для диагностики и эффективного лечения.

В ряде работ зафиксировано, что ключевыми цитокинами при иммунопатогенезе атопического дерматита являются ИЛ–4, ИЛ–13 и ФНО–альфа. Обострение данного заболевания сопровождается системными воспалительными изменениями, связанными с резким повышением уровней данных цитокинов (Th2–иммунный ответ). Единственным классом лекарственных средств, быстро и эффективно корректирующим проявления аллергического воспалительного процесса, являются глюкокортикостероиды (ГКС–препараты — в качестве альтернативной терапии), что определяет и спектр их показаний у больного с атопическим дерматитом.

В лечении хронической крапивницы ГКС-препараты применяются только при тяжелом течении заболевания, при тяжелых неконтролируемых обострениях, а также при полной неэффективности антигистаминных препаратов (когда в воспалительный процесс включаются другие посредники). В таких случаях применяют только короткие курсы преднизолона.

Современная медицина позволяет выбрать и другое альтернативное лечение. Достаточно широко используются иммуномодулирующие препараты. Иммуномодуляторы — это класс лекарственных средств, которые обладают иммунотропной активностью и в терапевтических дозах восстанавливают нарушенные защитные функции иммунной системы. Важно! Обычно они используются в комплексной терапии заболевания вместе с другими этиотропными средствами — антибиотиками, уросептиками, противовирусными препаратами.

15–20 лет назад иммуномодуляторы уверенно вошли в наш быт. Тогда произошло массовое увлечение этим классом препаратов, их использовали без особых на то показаний, просто для улучшения определенных параметров системы иммунитета.

На сегодняшний день в России зарегистрировано 468 препаратов этой группы из 26 стран. На фармацевтическом рынке страны присутствует 91 иммуномодулятор.

При выборе иммуномодулятора нужно помнить, что это препараты, воздействующие на конкретное звено иммунитета. Следует учитывать ряд факторов: цель иммунофармакотерапии, состояние иммунной системы, иммунофармакологические свойства препарата, его эффективность и безопасность, особенности его взаимодействия с другими лекарственными средствами.

По сути, любой иммуномодулирующий препарат нужно оценивать с позиции трех принципов рациональной фармакотерапии: эффективность, безопасность и удобство. Кроме того, иммуномодулятор не должен изменять нормальных показателей иммунитета и обладать избирательностью действия на дефект иммунитета.

При решении вопроса о необходимости применения таких препаратов в комплекс обследования пациента с дерматологическими проблемами важно включать еще и ряд иммунологических обследований. Это не определение иммунного статуса[4], а более информативные исследования. Например, все того же цитокинового профиля каждого конкретного пациента с определенной патологией. Без оценки характера и степени выраженности иммунных нарушений нельзя назначать иммуномодулирующее воздействие.

Назначаются иммуномодуляторы, как правило, в составе комбинированной терапии, они ни в коем случае не должны спорить с другими группами препаратов. Иногда иммуномодуляторы используются в качестве монотерапии — для профилактики острых заболеваний или обострения хронических процессов. Также при назначении иммуномодуляторов необходимо учитывать иммунотропные эффекты базисных лекарственных средств.

В своей клинической практике врачи-дерматологи могут опереться на иммуномодуляторы, которые обладают широкой доказательной базой и успешно применяются с позиции топической иммуномодулирующей терапии. Здесь можно отметить иммуносупрессоры — циклоспорин А уменьшает стимуляцию и пролиферацию Т–клеток; топические иммуносупрессоры — ингибиторы кальциневрина такролимус, пимекролимус (подавляют активацию Т–клеток). Также применяются регуляторные пептиды. Имеются работы, доказывающие их направленный противозудный эффект. Эти препараты восстанавливают баланс про– и противовоспалительных цитокинов (Иммунофан).

Еще одним методом альтернативного лечения, хорошо зарекомендовавшим себя при лечении таких сложных иммунопатологий, как атопический дерматит, является аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ). В качестве отдельного метода лечения АСИТ не используется. Применяется в комплексном лечении пациентов с сопутствующей бронхиальной астмой, аллергическим ринитом. АСИТ позволяет эффективно влиять на нарушение параметров цитокинового профиля.

Можно сказать, что пока ученые находятся в начале пути в исследовании цитокинового профиля. Полученные на сегодняшний день данные пока не перешли в разряд абсолютно точных знаний.

Но, тем не менее, последние амбициозные исследования по–новому представляют некоторые аспекты патофизиологии заболеваний кожи. Поиск путей рациональной фармакотерапии позволяет по–другому взглянуть на функции и взаимодействие между воспалительными клетками. Оценка, мониторинг и коррекция измененных параметров цитокинового профиля — сегодня один из ключевых подходов в поиске новых путей терапевтического воздействия в дерматологии. Ученые уверены, что в скором времени благодаря исследованиям параметров цитокинового профиля такие тяжелые, меняющие качество жизни пациентов заболевания, как иммунозависимые дерматозы, будут более понятны, а значит, и лучше поддаваться лечению.

Использованные источники: mosapteki.ru

ВАС МОЖЕТ ЗАИНТЕРЕСОВАТЬ:

  Дерматит головы и шеи

  Дерматит долго проходит

научная статья по теме ЦИТОКИНЫ ПРИ АТОПИЧЕСКОМ ДЕРМАТИТЕ Биология

Цена:

Авторы работы:

Научный журнал:

Год выхода:

Текст научной статьи на тему «ЦИТОКИНЫ ПРИ АТОПИЧЕСКОМ ДЕРМАТИТЕ»

ЦИТОКИНЫ ПРИ АТОПИЧЕСКОМ ДЕРМАТИТЕ © 2007 г. Д.В. Курамшина, С.В. Сенников, В.А. Козлов

ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск, Россия Поступила: 23.12.06 г. Принята: 02.04.07 г.

В обзоре представлены данные о локальной и системной продукции цитокинов у больных с атопическим дерматитом. Был проанализирован уровень экспрессии и продукции цитокинов Th2 и Th1 типа в период ремиссии и обострения атопического дерматита. Различные молекулярные механизмы, способствующие изменению баланса цитокиновой продукции, могут принимать участие в патогенезе атопического дерматита.

Ключевые слова: цитокины, атопический дерматит

Известно, что в патогенезе многих заболеваний иммунной и кроветворной систем существенную роль играет функциональная активность Т-хелперов первого (ТЫ) и второго (^2) типов и, в частности, продукция ими таких иммунорегуляторных цитокинов как ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10 и ИФНу. Уровень экспрессии и продукции этих цитокинов во многом определяет тип иммунного реагирования и состояние ремиссии и обострения многих заболеваний. Доминирование иммунного ответа ТЫ типа играет роль в патогенезе при органоспе-цифических аутоиммунных нарушениях, остром отторжении аллотрансплантата, повторяющихся абортах, контактных дерматитах и некоторых воспалительных нарушениях. В противоположность, доминирование иммунного ответа ^2 типа ответственно за снижение защиты против некоторых внеклеточных патогенов, трансплантационную толерантность, хроническую реакцию «трансплантат против хозяина», атопические заболевания и некоторые системные аутоиммунные заболевания [37].

Атопический дерматит (АД) — это хроническое воспалительное заболевание кожи, часто встречающееся у пациентов, имеющих в личном или семейном анамнезе такие заболевания как астму или аллергический ринит. Иммунологическая концепция патогенеза АД основывается на понятии атопии как генетически предопределенной аллергии, обусловленной гиперпродукцией реагиновых анти-

тел IgE и/или IgG4 [1] и некоторыми другими иммунологическими нарушениями, которые в свою очередь связаны с активацией группы генов цитокинов, включая ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-13, ГМ-КСФ, а также ряда других менее хорошо изученных генных продуктов [26, 28]. В настоящее время молекулярные основы для специфической активации генов этих цито-кинов и иммунологические последствия изучаются многими исследователями.

Экспрессия мРНК цитокинов Th1/2 типа и их продукция в очаге поражения при хроническом течении или обострении АД

В патогенезе АД различают стадии острого и хронического воспаления, которые имеют некоторые отличительные черты. Гистологически острое воспаление представлено инфильтратами, содержащими мононуклеары, включая большое количество активированных Т-лимфоцитов, внутриклеточным отеком (спонгиоз) и гиперплазией эпидермиса. Клеточные инфильтраты, содержащие в основном макрофаги и клетки Лангерганса, присутствуют и в очагах хронического воспаления, наряду с утолщением эпидермиса и наличием фиброза [28].

Анализ подклассов Th-клеток, инфильтрирующих кожу, через различные интервалы времени после антигенной стимуляции показал, что T-хелперы 2 типа играют ведущую роль в начальной фазе воспалительного процесса, тогда как T-хелперы 1 типа определяются в значительных количествах в поздней фазе аллергического воспаления [9]. В клинической модели острого воспаления у сенсибилизированных пациентов с АД, используя отдельно гибридизацию in situ и иммуногисто-

Адрес: 630099 Новосибирск, Ул. Ядринцевская,14, ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН. E-mail: ici@online.nsk.su

химию, Barata показал, что количество ИЛ-4 и ИЛ-5 мРНК положительных клеток в поздней фазе аллерген-индуцированной кожной реакции у атопиков достигает пика к 24 часам, что соответствует максимальной интенсивности клинических проявлений (гиперемия, отёк, зуд). Путем исследования 24-часовых кожных биоптатов методом двойной in situ гибридизации/иммуногистохимии было показано, что как эозинофилы, так и тучные клетки и Т-клетки в разной степени вносят свой вклад в экспрессию ИЛ-4 и ИЛ-5 мРНК, причем процент позитивных по мРНК ИЛ-4 и ИЛ-5 Т-клеток был очень низким (5%), что объясняется неспособностью Т-клеток накапливать необходимое для определения данным методом количество мРНК указанных цитокинов [7]. Другим исследователем, Hamid, методом гибридизации in situ в очагах как острого, так и хронического воспаления при АД было обнаружено значительное повышение количества мРНК ИЛ-4 и ИЛ-5 положительных клеток по сравнению со здоровыми донорами, причем в очагах хронического воспаления доминировали мРНК ИЛ-5 положительные клетки и активированные эозино-филы наряду со значительно более низким содержанием мРНК ИЛ-4 положительных клеток [17]. При проведении провокационных тестов аллергенами клещей домашней пыли пациентам с АД методом аппликации аллергена, через 24 часа определялось повышение уровня экспрессии мРНК ИЛ-4 и ИЛ-2, но не ИФНу, по сравнению с контролем. Спустя 48 часов, напротив наблюдалось значительное увеличение экспрессии мРНК ИФНу и ИЛ-2, тогда как уровень экспрессии мРНК ИЛ-4 снижался по сравнению с исходным. В данном исследовании увеличению экспрессии мРНК ИФНу предшествовало усиление экспрессии p35 субъединицы мРНК ИЛ-12. Полученные результаты демонстрируют наличие двухфазной ТЫ/1Ъ2-опосредованной реакции в ответ на провокацию аэроаллергенами у пациентов с АД, причем переключение на преимущественно Th1 тип ответа происходит под действием ИЛ-12 [16]. Рядом авторов было показано, что в хронической фазе АД активированные Т-клетки экспрессируют набор цитокинов, включающий цитокины как Th2 (ИЛ-4 и ИЛ-10), так и Th1 (ИФНу) профиля [6, 50]. Изучая профиль продукции цитокинов Т-клеточными клонами, полученными из очагов хронического воспаления кожи пациентов, страдающих АД, авторы другой работы обнаружили, что нестимулированные

Т-клеточные клоны продуцируют цитокины ТЫ профиля. После стимуляции анти-CD3 и анти-CD28 моноклональными антителами отмечалось повышение количества ^2 лимфоцитов с последующим нарастанием Т-клеток, продуцирующих ИФНу. Кроме того, было зафиксировано повышение продукции ИЛ-10 через 24 часа после стимуляции. На основании полученных данных авторы пришли к заключению, что Т-лимфоциты, инфильтрирующие кожу, состоят из гетерогенной популяции ^2 и ТЫ типов, либо ТМ [19]. Таким образом, согласно приведенных выше данных, в ходе развития воспалительного процесса при атопическом дерматите в коже происходит последовательная активация продукции цитокинов ^2 и ТЫ типов. Местные реакции острой стадии аллергического воспаления модулируются преимущественно цитокинами ^2 типа, тогда как в хроническом очаге под воздействием ИЛ-12 происходит изменение баланса медиаторов в пользу цитокинов ТЫ типа.

Экспрессия мРНК и продукция цитокинов П1/2 типа клетками периферической крови при хроническом течении или обострении АД

Matsuyama с соавторами отмечают, что МНК ПК пациентов с АД продуцируют низкие уровни ИФНу в ответ на стимуляцию антигеном Dermatophagoides farinae плюс ИЛ-2 или моноклональными антителами ОКТ3, по сравнению с МНК ПК, полученными от здоровых доноров. Авторы полагают, что уменьшение продукции ИФНу Т-клетками пациентов с АД имеет отношение к дефекту CD4+ Т-клеток, но не CD8+ Т-клеток. Ими было показано уменьшение количества продуцирующих ИФНу CD4+ Т-клеток (ТЫ клетки) у пациентов с АД по сравнению со здоровыми донорами. Исходя из результатов фенотипиче-ского анализа с использованием проточной цитометрии было также обнаружено значительное уменьшение количества CD4+ CD45RO+ Т-клеток памяти у больных с АД по сравнению со здоровыми донорами. Кроме количественного дефекта этих клеток, был обнаружен и функциональный их дефект. Обогащенная популяция CD4+ CD45RO+, полученная от пациентов с АД, с наличием значительно ослабленного ГЗТ ответа на туберкулиновый тест, продуцировала незначительные количества ИФНу в ответ на стимуляцию моноклональными антителами ОКТ3 или очищенным белковым дериватом. Таким об-

разом, по мнению авторов, иммунологические нарушения при АД, связанные с Th1 типа, индуцируются как количественным, так и качественным дефектом Т-клеток памяти [31]. По данным других исследователей, у пациентов с АД оказалось в 2 раза меньше ИФНу продуцирующих циркулирующих Т-клеток по сравнению со здоровыми донорами, причем наблюдалось уменьшение количества как клеток с фенотипом Th1 (CD4+), так и Тс1-клеток (CD8+). Кроме того, отмечено снижение соотношения уровня мРНК ИФНу/ИЛ-4 и ИФНу/ИЛ-10 в Т-клетках от больных АД по сравнению с контролем. Таким образом, было показано, что при АД наблюдается снижение ИФНу продуцирующих клеток как Th1, так и Тс1 фенотипа, что может сказываться не только на увеличении продукции IgE, но также объясняет высокую частоту инфицирования кожи при АД [30].

Есть мнение, что уменьшение продукции ИФНу является не следствием, а причиной развития состояния атопии. Соотношение продукции ИЛ-4 и ИФНу, а также формирование из ThO-клеток Т-клеток памяти, продуцирующих высокий уровень ИФНу или высокий уровень ИЛ-4, в большой степени зависят от факторов, секретируемых антигенпредстав-ляющими клетками (моноцитами и дендритными клетками). Важными факторами с этой точки зрения являются ИЛ-12 и PGE2. Известно, что ИЛ-12 усиливает продукцию ИФНу, тогда как PGE2 её ингибирует. В своём исследовании авторы показали, что при АД происходит избирательное увеличение продукции PGE2 моноцитами периферической крови больных, по сравнению со здоровыми донорами, приводящее к увеличению соотношения PGE2/ИЛ-12 и повышению соответственно продукции цитокинов Th2 типа и, в частности, ИЛ-4 [43]. Существуют данные, что, хотя МНК ПК больных АД и продуцируют нормальное количество ИЛ-12, а также характеризуются нормальным уровнем экспрессии его рецептора, они не способны к генерации адекватного ИЛ-12 — индуцированного ИФНу ответа. Авторы объясняют этот феномен гиперпродукцией при АД ИЛ-10 и ИЛ-4 [27].

Как известно, ИЛ-4 необходим для синтеза IgE и играет ключевую роль в процессе формирования из CD4+ предшественников Th2 типа как у мыш

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

Использованные источники: naukarus.com

Related Post